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          二全磷植物的测定

          2025-05-11 19:34:14 [知识] 来源:灵境书斋

          四、植物钼锑抗比色法

          1、全磷方法原理

          植物中的测定氮、磷是植物以有机态为主,钾则以离子态存在。全磷用浓H2SO4-H2O2氧化剂消煮植物样品时,测定其中的植物有机物经脱水碳化、氧化分解,全磷变成CO2和H20,测定使有机氮和磷转化为铵盐和磷酸盐,可在同一份消煮液中分别测定全氮、植物磷、全磷钾(见磷、测定钾测定)。植物而且该消煮液对于热馏、全磷扩散和比色等定氮方法均适用。测定

          消煮液中的铵盐在碱化后成为NH3,经扩散(或蒸馏),用H3BO3溶液吸收,直接用标准酸溶液滴定,以甲基红一浪甲酚绿混合指示剂指示滴定终点,即由蓝变萦红色。由此计算含氮量。

          2、仪器及设备

          分光光度计。

          3、试剂

          过氧化氢〔ω(H2O2) ≈30%,分析纯]。

          4、操作步骤

          (1)H2SO4-H202消煮:称取烘干、磨碎(0.25mm)植物样品0.3000g~0.5000g,置于50mL开氏瓶(或消煮管)中(勿将样品粘附在瓶颈上)。先滴入少些水湿润样品,然后加8mL浓H2SO4,轻轻摇匀(最好放置过夜),瓶口放一弯颈小漏斗,在电炉(或消煮炉)上先文火消煮,待H2SO4分解冒大量白烟后再升高温度,当溶液呈均匀的棕黑色时取下。稍冷后加10滴H2O2,摇匀,再加热至微沸,消煮约5min,取下,稍冷后,重复加H2025滴~10滴,再消煮。如此重复共3次~5次,每次添加的H202量应逐次减少,消煮到溶液呈无色或清亮后,再加热约5 min~10min,以除尽剩余的H2O2(否则会影响N,P比色测定)。取下,冷却。用少量水冲洗弯颈漏斗,洗液流入开氏瓶。将消煮液无损地洗入100 mL容量瓶中,用水定容,摇匀。过滤或放置澄清后供氮、磷、钾的测定。

          (2)钼锑坑比色吸取待测液2.00mL~5.00mL(含P5μg~25μg)于50mL容量瓶中。称取通过100目((0.149mm)的烘干土壤样品0.2500g 置于铂坩埚中,另外称取研细的无水碳酸钠(试剂1) 2g,将其中的1.8g小心地用玻璃棒与样品充分搅拌混匀,其余的碳酸钠铺盖于混合物表面,并轻轻敲动坩埚,使表面铺平。将坩埚放入温电炉中,升温至900℃~920℃熔融,20min后取出,趁热时揭盖观察熔块状态,若表面成凹形,颇色匀一,无气泡时则熔融已完全(若有白色原状碳酸钠或表面高低不平者,则表示熔触尚不完全,应继续熔5min~10 min)。待坩埚冷却至不太烫手时,益好坩埚盖,戴上手套,将坩埚轻轻振拍,使熔块脱出(如熔块尚不能脱出,可用手轻轻捏动坩埚四周,使熔块与坩埚脱离)。然后将熔块移入100mL高型烧杯中,盖上表面皿,小心地加入约10mL硫酸溶液(试剂2)溶解熔块,并用热水洗净坩埚。将烧杯中的内容物洗入100 mL容量瓶中,用热水及橡皮头玻瑞棒洗净烧杯,洗涤液均倒入上述容量瓶中,冷却后定容,用干燥泥斗和无磷滤纸过撼于三角瓶中。

          吸取溶液5mL~10mL(含5μgP~25μgP)于50mL容量瓶中,加水稀释至约30 mL,加二硝基酚指示剂2滴,用碳酸钠溶液[c(二分之一Na2CO3)=4mol·L-1〕或氢氧化钠溶液[c (NaOH )=2mol·L-1〕及稀硫酸溶液[c(二分之一H2SO4)=0.5 mol·L-1)〕调节pH至溶液刚呈微黄色。然后加入钼锑抗显色剂(试剂4)5mL,摇匀,用水定容。在室温高于15℃的条件下放置30min后,在分光光度计上用波长700nm(光电比色计用红色滤光片)比色,以空白试验溶液为参比液调零点,读取吸收值,在工作曲线上查出显色液的Pmg·L-1数。颜色在8h内可保持稳定。

          (3)工作曲线的绘制

          分别吸取磷标准溶液(试剂7)0mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL、于50mL容量瓶中,加蒸馏水稀释至约30mL,加入钼锑抗显色剂5mL,摇匀,定容。即得0、0.1mg·L-1、0.2 mg·L-1、0.3 mg·L-1、0.4 mg·L-1、0.5 mg·L-1、0.6 mg·L-1标准系列溶液,与待测溶液同时比色,读取吸收值。在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标,P mg·L-1数为横坐标,绘制成工作曲线。

          5、结果计算

          稀释倍数为:

          参考资料:土壤农业化学分析方法

          (责任编辑:综合)

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